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技術(shù)文章 / article
胰酶在細胞培養(yǎng)中起到什么作用
2022-08-01 瀏覽次數(shù)：1794
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān)，在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時，胰酶溶液的作用能力強。使用胰酶時，應(yīng)把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時應(yīng)選用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ，如： D-Hanks 液。終止消化時，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。
1. 稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為 0.25 %，用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào) PH 到 7.2 左右）或 PBS （ D-hanks ）液中。攪拌混勻，置于 4℃ 內(nèi)過夜。
2. 用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器（ 0.22 微米微孔濾膜）抽濾除菌。
3. 分裝成小瓶于 -20℃ 保存以備使用可！
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